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　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動物急性吸入毒性試臉的試驗?zāi)康摹⒍x、試驗基本原則、試驗方法。

 

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于評價氣體、揮發(fā)性物質(zhì)或氣溶膠／顆粒物等化學(xué)品的急性吸入毒性作用。

 

 

　　在規(guī)定時間內(nèi)，各試驗組動物吸入濃度不同的受試樣品，可以通過預(yù)試驗來選擇染毒濃度。檢測毒物對動物的毒性反應(yīng)及死亡情況。在試驗中死亡的動物將被驗尸，而試驗結(jié)束時還活著的動物要處死并進(jìn)行大體解剖。

 

 

 

　　健康成年小鼠（18g~22g）或大鼠(180g~220g)，也可選用其他敏感動物。同性別各劑量組個體間體重相差不超過平均體重的20％。在試驗前，在試驗環(huán)境下，動物要不低于適應(yīng)3d~5d時間。

 

 

　　根據(jù)所選方法的要求，原則上應(yīng)設(shè)4~5個劑量組，每組動物一般為10只，雌雄各半。各劑量組距離大小用受試物毒性大小與動物死亡為宜，一般把組距大、動物數(shù)量少進(jìn)行預(yù)試。若受試樣品毒性很小，也可使用20只動物（雌雄各半）的一次限量法。一般2000mg/m3，吸入4h，如未引起動物死亡，急性吸入毒性試驗就不再進(jìn)行多個劑量。需要時也可做5000mg/m3，或更高濃度吸入4h，或以可能發(fā)生的濃度進(jìn)行試驗。

 

 

　　染毒可采用靜式染毒法或動式染毒法。

 

 

　　靜式染毒是把實驗動物放在規(guī)定體積的密閉容器（染毒柜）中，加入一定量的受試樣品，并使其揮發(fā)，造成試驗需要的受試樣品濃度的空氣，一次吸人性染毒2h或4h。

 

　　4. 3.1.1染毒柜的容積以每只染毒小鼠每小時不少于3L空氣計，每只大鼠每小時多于30L計。

 

　　4. 3.1.2染毒濃度的計算：染毒濃度一般應(yīng)采用實際側(cè)定濃度。在染毒期間一般可測4~5次，求其平均濃度。在無適當(dāng)側(cè)試方法時。可用式（1）計算染毒濃度：

 

　　c=（a×d/V) ×106· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· ·（1)式中：

 

　　c——染毒濃度，單位為毫克每立方米（mg/m3);

 

　　a——加入受試樣品的量，單位為毫升（mL);

 

　　d——化學(xué)品相對密度;

 

　　V——染毒柜容積，單位為升（L）。

　　4. 3.2動式染毒法

 

　　動式染毒是采用機械通風(fēng)裝置，把含有一定濃度受試樣品的空氣連續(xù)、均勻不斷地送入染毒柜，空氣交換量大約為12次／h~15次／h，并排出等量的染毒氣體，保持相對固定的染毒濃度（對通過染毒柜的流動氣體應(yīng)不間斷地進(jìn)行監(jiān)側(cè)，并至少記錄2次）。

 

　　一次吸入性染毒2h。如果受試化合物有特殊要求，那就應(yīng)該采用其他的氣流速率。染毒時，染毒柜中至少要保證19％的氧含量與均衡分配的染毒氣體。

 

　　一般而言，為保證染毒柜內(nèi)空氣穩(wěn)定，試驗動物的體積必須小于染毒柜體積的5％。且染毒柜內(nèi)要保持徽弱的負(fù)壓，避免受試樣品泄露對周圍環(huán)境造成污染。與此同時，要注意避免受試樣品爆炸。

 

　　4. 3.2.1受試樣品氣化（霧化）和輸入的常用方法

 

　　4. 3.2.1.1氣體受試樣品，經(jīng)流量統(tǒng)計與空氣混合成一定濃度后，直接輸入染毒柜。

 

　　4. 3.2.1.2易揮發(fā)液體受試樣品，揮發(fā)后，通過空氣鼓泡或適當(dāng)加熱促使輸入染毒柜。

 

　　4. 3.2.1.3若受試樣品現(xiàn)場使用時采取噴霧法時，可以用噴霧器或超聲霧化器來讓它霧化為氣溶膠，然后輸入染毒柜。

 

　　4. 3.2.2染毒濃度計算

 

　　一般情況下，染毒濃度應(yīng)采用動物呼吸帶實際側(cè)定濃度，不低于每半小時一次，取其平均值。各側(cè)定濃度值應(yīng)在其平均值的25％以內(nèi)。若無適當(dāng)?shù)膫?cè)試方法，也可采用式（2）計算染毒濃度：

 

　　c= [a×d/（V1+ V2) ] ×106· · ·· · ···· · ··· ·· · ·（2)式中：

 

　　c——染毒濃度，單位為毫克每立方米（mg/m3);

 

　　a——氣化或霧化受試樣品的量，單位為毫升（mL);

 

　　d——受試樣品相對密度;

 

　　V1——輸入染毒柜風(fēng)量，單位為升（L）。

 

　　V2——染毒柜容積，單位為升（L）。

 

 

　　4. 4.1 觀察并記錄染毒過程和觀察期內(nèi)的動物中毒和死亡情況。觀察期限一般為14d。

 

　　4. 4.2 對死亡動物進(jìn)行尸檢。觀察期結(jié)束后，處死存活動物并進(jìn)行大體解剖，必耍時，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

 

 

　　當(dāng)評價試驗結(jié)果時，LC50應(yīng)結(jié)合觀察到的毒性效應(yīng)及尸檢所見考慮，LC50值是受試樣品急性毒性分級和標(biāo)識以及判定受試樣品經(jīng)呼吸道吸入后引起動物死亡可能性大小的依據(jù)。引用LC50值時一定要注明所用實驗動物的種屬、性別、染毒方式及時間長短、觀察期限。

 

　　評價應(yīng)包括動物接觸受試樣品與動物異常表現(xiàn)（包括行為和臨床改變、大體損傷、體重變化、致死效應(yīng)及其他毒性作用）的發(fā)生率和嚴(yán)重程度之間的關(guān)系。

 

　　以上就是關(guān)于動物急性吸入毒性試驗方法的介紹，希望對大家有所幫助。

 

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