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　　上文講述了真菌毒素檢測方法中的氣相色譜及其聯用方法，接下來小編講解真菌毒素檢測的方法當中的另一個方法：氣相色譜及其聯用方法。

 

　　酶聯免疫吸附法(ELISA）始于20世紀70年代，是一種將抗原和抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化作用有機結合起來的真菌毒素檢測技術。隨著單克隆抗體技術的發展應用及免疫試劑盒的商業化，ELISA 已廣泛應用于分析檢測領域。

 

　　其基本原理是在不損壞其免疫活性的條件下把抗原或抗體預先結合到某種固相載體表面；測定時，將受檢樣品(含待測抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按一定程序與結合在固相載體上的抗原或抗體起反應形成抗原或抗體復合物；反應終止時，固相載體上酶標抗原或抗體被結合量(免疫復合物)即與標本中待檢抗體或抗原的量成一定比例；

 

　　經洗滌去除反應液中其他物質，加入酶反應底物后，底物即被固相載體上的酶催化變為有色產物，最后通過定性或定量分析有色產物量即可確定樣品中待測物質含量。在真菌毒素檢測中應用這樣一種快速、簡便、特異靈敏的技術，意義尤為重大。

 

　　用上述法檢測發現，18批中成藥中黃曲霉毒素B，(AFB)的含量均小于1 ug kg-'；測定30種常用藥材及7個品種20批次中成藥中的黃曲霉毒素B，30種藥材中黃曲霉毒素B含量最低值為5.46 ug kg-'，最高值為35.94 ug kg-'；20批中成藥中黃曲霉毒素B最低為16.66 ug kg-'，最高為49.60 ug kg'；生等測定了20批中藥材及2批中成藥中AF的含量，AF的含量范圍為О~200 ug kg-'，18批中藥材AFB含量超過5 ug kg-'，2批制劑中 AFB含量分別為23.7 ug kg-'和29.5 ug kg-'。

　　采用間接競爭酶聯免疫吸附法測定杏仁、酸棗仁、牽牛子、冬瓜子等種子類中藥材中AFB，的含量。結果表明，所測樣品均有不同程度的AFB污染，其中一批益智仁中AFB含量超過20ug kg-'。采用自制抗-OTA兔血清抗體(IgC)及雞卵黃抗體(IgY)建立了檢測OTA的ELISA方法。檢測IgCG和 IgY的靈敏度分別為10ng mL-'和1 ng mL-'。

 

　　制備了基于玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)-陽離子化蛋白結合物的ZEN抗體。ZEN通過曼尼西反應與陽離子化牛血清白蛋白(cBSA)配對。BALB/c(系)小鼠與ZEN-cBSA 免疫接觸后，迅速誘導產生免疫反應。ZEN 多克隆抗血清和單克隆抗體的滴定度分別為30000 和20000，與5種類似物的交叉反應率分別為小于7%和小于2%。隨后建立了基于ZEN單克隆抗體的間接競爭酶聯免疫吸附法，用該法檢測中藥中ZEN的回收率為80%~120%，變異系數小于15% 。

 

　　構建了檢測AFM的直接競爭-酶聯免疫吸附（dc-ELISA)體系，將辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase，HRP)與高純度抗AFM單克隆抗體進行偶聯后對其與AFM競爭性反應條件進行優化，并利用AFM污染標準物質ERMI -BD282(O)、ERMI -BD283 (0.11 ug kg-')、ERMI -BD284(0.44 ug kg-')等對檢測體系的靈敏度和精確性進行驗證。檢測范圍為0.015~4.05 ug L-'，平均回收率為80% ，dc-ELISA可滿足AFM國家殘留限量標準0.5ug kg-'的檢測要求。

 

　　以上就是小編關于真菌毒素檢測的方法當中的另一個方法：氣相色譜及其聯用方法的歸納總結，希望對大家有所幫助。還想了解更多檢測項目繼續關注第三方檢測機構——中科檢測。（原文出處：中藥中真菌毒素檢測方法的最新研究進展）