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毒理檢測：基因突變試驗方法有哪些？
發布時間：2021-07-22 272
　　基因突變試驗的研究已成為當今生命科學研究的熱點之一，檢測方法也隨之迅速發展。人類細胞癌基因的突變類型已如上所述，對于基因突變試驗檢測，1985 以前，利用Southern 印跡法，可以篩選出基因的缺失、插入和移碼重組等突變形式。對于用該法法不能檢測的突變，只能應用復雜費時的DNA 序列測定分析法。
 
　　基因突變試驗目的是檢測產品對體外培養的哺乳動物細胞可否引起基因突變，以對產品的致突變性做出評價。那么常見的基因突變試驗檢測方法有哪些？中科檢測帶你科普。
 

　　1、基因突變試驗方法-焦磷酸測序法

 
　　測序法的基本原理是雙脫氧終止法，是進行基因突變檢測的可靠方法，也是使用最多的方法。但其過程繁瑣、耗時長，靈敏度不高，對環境和操作者有危害，故在臨床應用中存在一定的限制。
 

　　2、基因突變試驗方法-單鏈構象異構多態分析技術

 
　　依據單鏈DNA在某一種非變性環境中具有其特定的第二構象，構象不同導致電泳的遷移率不同，從而將正常鏈與突變鏈分離出來。與測序法相比，靈敏性更高。
 

　　3、聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性分析技術

 
　　通過聚合酶鏈反應擴增出可能包含突變的基因組片段，然后利用限制性內切酶對這些聚合酶鏈反應片段進行酶切，電泳檢測后根據酶切片段的長度差異來判斷是否存在突變位點。該法一般用于檢測已知的突變位點。



基因突變試驗



　　4、基因突變試驗方法-探針擴增阻滯突變系統

 
　　又稱等位基因特異聚合酶鏈反應，是利用Tap DNA聚合酶缺少3′到5′外切酶活性，聚合酶鏈反應引物的3′端末位堿基必須與其模板DNA互補才能有效擴增的原理。通過設計適當的引物以檢測突變基因。
 

　　5、基因突變試驗方法-高分辨率溶解曲線分析技術

 
　　利用不同長度或不同堿基組成的DNA序列溶解曲線不同的原理，在聚合酶鏈反應后直接運行高分辨率溶解即可完成對樣品突變分析。該技術是一種靈敏度100%的表皮生長因子受體基因突變篩選技術，可用于體細胞突變的檢測。
 

　　6、基因突變試驗方法-高效液相色譜法

 
　　該方法是基于發生錯配的雜合雙鏈DNA與完全匹配的純合雙鏈DNA解鏈特征的差異而進行檢測的，可檢測出含有單個堿基的置換、插入或缺失的異源雙鏈片段。與測序法相比，該法簡單、快速，不僅可用于已知突變的檢測，還可用于未知突變的掃描。但只能檢查有無突變，不能檢測出突變類型，結果判斷容易出錯。
 

　　7、基因突變試驗方法-微數字聚合酶鏈反應

 
　　該方法為將樣品作大倍數稀釋和細分，直至每個細分試樣中所含有的待測分子數不超過1個，再將每個細分試樣同時在相同條件下聚合酶鏈反應后，通過基因芯片逐個計數。該方法為絕對定量的方法。
 
　　以上就是常見的基因突變試驗檢測方法，如有毒理檢測、基因突變試驗等項目問題，歡迎咨詢中科檢測。
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