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病毒保存液分類 病毒保存液病毒滅活測試方法
發(fā)布時間：2022-12-14 256
　　病毒保存液適用于新型冠狀病毒、流感病毒、手足口病毒等常見病毒樣本采集保存運輸工作，是采樣管內(nèi)浸末采樣拭子病毒樣本一種保護(hù)病毒的被檢測物質(zhì)的液體，可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本，儲存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或純化等臨床實驗。

　　病毒保存液分類

 
　　病毒保存液分為兩種：滅活型和非滅活型。
 
　　滅活型的病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液，里面添加有高濃度的裂解鹽，能夠迅速高效地使待測樣本里的病毒蛋白裂解失活，可以有效防止感染，同時又含有Rnase酶抑制劑，能保護(hù)病毒核酸不被降解，后續(xù)的NT-PCR實驗只要能檢測出病毒的核酸既可以做出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的時間。
 
　　非滅活型保存液主要是以運送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液型保存液。它可以同時保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA，這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性，當(dāng)然操作失誤時也有一定的感染性風(fēng)險。采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫。
 
　　不管是何種病毒保存液，我們在采樣過后都要盡快檢測或者嚴(yán)格低溫保存，保證檢測做到準(zhǔn)確無誤。因病毒的繁殖與變異速度較快，要維持病毒樣本的穩(wěn)定性，病毒保存液起到至關(guān)重要的作用。


　　病毒保存液病毒滅活測試方法

 
　　1、病毒保存液檢測對象
 
　　毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
 
　　細(xì)胞：MDCK細(xì)胞
 
　　2、病毒保存液檢測步驟：
 
　　1）取樣品病毒保存液（非滅活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測試液，存至要求溫度；
 
　　2）保存至對應(yīng)天數(shù)后取出測試液，檢測病毒滴度；
 
　　a）10倍倍比稀釋測試液；
 
　　b）將稀釋液加入含生長至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，并設(shè)置正常對照組，加等量培養(yǎng)液；
 
　　c）置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天，每天觀察細(xì)胞增長狀況；
 
　　d）當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時，記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況；
 
　　e）根據(jù)Reed-Muench公式計算半數(shù)感染量TCID50。
 
　　中科檢測作為專業(yè)的第三方檢測機構(gòu)，開展病毒采集管檢測，病毒保存液病毒滅活測試，報告內(nèi)容主要包含試驗毒株、實驗批次、保存溫度、保存天數(shù)、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測數(shù)據(jù)，具體費用及周期可以咨詢中科檢測工程師了解。
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